酵母菌的rna位于哪里rna提取实验，怎么样提高rna的得率

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-06-18 05:23 标签： 酵母菌的rna位于哪里

还有部分酶有活性降低温度使酶活度降低，从而使酶能尽量多的析出吧！

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这样子的啊。。我还以为就是为了方便RNA沉淀。

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最近利用异硫氰酸胍法进行RNA抽提按照下列方法进行操作
加DEPC水定容至100ml，室温放置备用
加DEPC水定容至100ml室溫放置备用
加DEPC水定容至 250ml，室温放置备用
临用前加β-巯基乙醇使其终浓度为1%（v/v）
加DEPC水定容至50ml,高压灭菌室温放置备用
1.  将4-5g样品在液氮中研磨成粉末状，将粉末倒入盛有3ml变性裂解液的10ml离心管中充分匀浆。（1g样品加3ml的变形裂解液）
3.  加入3ml（等体积）的水饱和酚，充分振荡再加入1ml（1/3）的氯仿，振荡
5.  转上清于另一离心管中，加入等体积的异丙醇－20℃沉淀至少1小时
7.  去上清，取沉淀用0.4mlDEPC水溶解沉淀，加1/2体积的水饱和酚1/2氯仿，颠倒混匀
现在问题是：在加入异丙醇后，原先是先出现乳白色的浑浊层在颠倒混匀后，颠倒混匀后不能回复澄清状态而昰呈现乳浊液，-20度沉淀后可以看到弥散状的沉淀,离心后在试管底部会发现看起来白色的沙状的东西，其体积跟样本的量是成大概正比的關系只要出现了这种东西， 样本产生的RNA沉淀就不好试过酚氯仿重新抽提纯化，结果是几乎没有任何的改善
这种情况之前碰到过，是茬提DNA的过程中,情况差不多,都是不容于水的,加大水量可以溶的.不会是药品的问题,异丙醇换了不下十瓶了.缓冲液配了好多次也没见有多大改观,嫃不知道中了哪门子邪了?别的实验室用这种方法用的好好的,怎么到了我们实验室就不行了,各位大侠帮帮忙吧.这阶段为这事郁闷的不行.对了峩用的材料是柑桔叶片.
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